研究揭示,微卫星中的重复单位数目存在高度变异,这些变异表现为整倍性变异或序列不完全相同,导致多个位点的多态性。
据此,人们发展了SSR标记,其全称为sequence tagged microsatellite site,是目前最常用的微卫星标记之一。通过将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序,根据微卫星侧翼序列人工合成引物进行PCR扩增,单个微卫星位点得以扩增。
由于单个微卫星位点重复单元数量的变异,个体的扩增产物在长度上产生变化,形成长度多态性,即简单序列重复长度多态性(SSLP),每扩增位点代表一对等位基因。SSR标记揭示的多态性比RFLP高得多,主要得益于SSR重复单元数量的显著变化。
与其它分子标记相比,SSR标记具有数量丰富、覆盖整个基因组、多等位基因特性、遗传方式遵循孟德尔定律、共显性以及易于不同实验室间合作等优点。
因此,SSR标记广泛应用于遗传图谱构建、目标基因定位、指纹图绘制等研究领域。然而,建立SSR标记需要对微卫星侧翼序列进行克隆、测序、人工设计合成引物以及标记定位和作图等基础性研究,其开发费用较高,各实验室需合作才能开发更多标记。
鉴于SSR标记的应用价值和种属特异性,目前在主要农作物中已进行合作,共同开发STMS引物。
扩展资料
SSR(Si mple Sequence Repeats)标记是近年来发展起来的一种以特异引物PCR为基础的分子标记技术,也称为微卫星DNA(MicrosatelliteDNA),是一类由几个核苷酸(一般为1~6个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列.由于每个SSR两侧的序列一般是相对保守的单拷贝序列