A、引物是一小段单链DNA或RNA，可与DNA母链通过碱基互补配对进行结合，A错误；

B、PCR反应获得的DNA分子只含有引物Ⅰ、只含有引物Ⅱ、同时含有引物Ⅰ和引物Ⅱ，B错误；

C、PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三步，C正确；

D、DNA在260nm的紫外线波段有一强烈吸收峰，峰值大小与DNA的含量是正相关，D错误．

故选：C．