求取vm与km的方法：1/V=Km+[S]/Vmax[S]改写成1/V=Km/Vmax[S]+1/Vmax。实验时选择不同的[S]测定相应的v，求出两者的倒数，以1/v对1/[S]绘出工作曲线，然后利用斜率，换算出Km。

因为实验测得的数据总是在理论值上下波动，所以没两组数据得到得结果都会不一样，一般通过将所有数据作图就可以得到较为精确的数据。如果要求不是很精确的话，直接用两组数据算也可以。

测定Km和Vm，一般通过作图法求得。作图方法很多，其共同特点是先将米氏方程式变换成直线方程，然后通过作图法求得。

Km值

等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度，是酶的特征常数之一。不同的酶Km值不同，同一种酶与不同底物反应Km值也不同，Km值可近似的反映酶与底物的亲和力大小：Km值大，表明亲和力小；Km值小，表明亲合力大。米氏方程：V=Vmax[S]/(Km+[S])[S]表示底物浓度，Vmax表示最大酶促反应速度。