邻近标记技术，作为理解蛋白互作的新利器，已在生物研究中崭露头角。这种技术突破了传统方法的局限，如免疫共沉淀和Pull down的不足，特别适用于捕获细胞内瞬时或微弱的相互作用。它利用酶如Biotin ligase与目标蛋白融合，通过共价修饰标记邻近蛋白，再通过亲和素富集鉴定。PL包括BioID、BioID2、Split-BioID等，如BioID2的出现，解决了分子量较大可能影响标记效率的问题，而Split-BioID则通过拆分酶活性片段，提供了更精确的相互作用分析（图1）。

TurboID和miniTurbo等新型标记酶的出现，显著增强了标记效率，减少了标记时间对瞬时相互作用的影响。如split-TurboID，通过非活性片段的重组，克服了高分子量融合蛋白的挑战，提供了更高的活性和定位精度（图4）。ProtA-TurboID则无需额外遗传操作，适用于各种细胞类型。

邻近标记技术的进步还包括BASU、AirID和splitAirID等，这些改良版本提高了标记效率和信噪比，适用于特定应用，如识别与组蛋白相互作用的蛋白质（图5）。HRP和APEX系列酶，如APEX2，不仅用于蛋白质组学，还扩展到RNA标记和亚细胞转录组研究。

尽管技术多样，它们共同特点是活细胞表达、靶向特定区域并标记邻近分子。PL技术广泛应用，包括疾病研究，揭示了蛋白互作与疾病关联。未来，邻近标记技术将继续在揭示分子调控网络中发挥关键作用，期待它在更多领域的深入应用（图2-5）。