接种环的大小，接种环的灭菌。

1、接种环的大小：接种环的大小根据接种的微生物种类和接种量来选择，接种环的直径略小于培养皿的直径，以便于在培养皿上划线。

2、接种环的灭菌：接种环在使用前必须进行灭菌处理，以确保接种的微生物不被污染，接种环可以采用高压蒸汽灭菌或火焰灭菌等方法进行灭菌处理。