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载脂蛋白CⅢ载脂蛋白CⅢ医学检查

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载脂蛋白CⅢ医学检查主要包含血液生化检查中的脂类测定。其原理涉及两种主要方法:

(1) 免疫透射比浊法

此法基于血清ApoCⅢ与试剂中的特异性抗人ApoCⅢ抗体结合形成不溶性免疫复合物,导致反应液混浊,通过光度计在340nm波长测量吸光度,吸光度的高低反映血清标本中ApoCⅢ含量。试剂中加入聚乙二醇(PEG)能促进抗原抗体反应。血清稀释和表面活性剂有助于暴露HDL ApoCⅢ抗原位点,使其与特异性抗体充分反应,表面活性剂减轻血清空白浊度。

(2) 火箭电泳法

火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的改进,通过直流电使抗原(ApoCⅢ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散。抗原向阳极移动,与凝胶中的抗体反应,形成类似火箭的沉淀峰。峰高与抗原浓度成正比,可用于定量分析。

具体操作方法如下:

(1) 免疫透射比浊法

标本应为及时分离的空腹血清,并于2~6℃冰箱中短期保存。使用仪器包括精密光度计、样品池、抗血清及校准血清。标本处理:稀释1:200后与校准血清一同操作。混匀后,在340nm比浊,根据吸光度值读取结果。校准曲线:每批测定需做,确保浓度与吸光度相关系数在0.985以上。

(2) 火箭电泳法

浇板:将10g/L琼脂糖溶液、抗血清和apoB抗血清混合,冷却后倒入玻璃板,打孔。稀释抗原:用0.15mol/L NaCl液稀释校准血清及标本。加样:将稀释的定值血清及标本分别加入加样孔。通电:稳流电泳,电泳后脱杂蛋白,制干胶膜,染色后脱色。

正常值:单向免扩散法测定范围为90~164mg/L。

临床意义:ApoCⅢ水平升高与高脂血症相关。

相关疾病:高脂血症。