E 花结形成分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞为了深入研究T、B细胞的生物学特性和功能,必需从淋巴细胞群体中分离出单一的T细胞或B细胞,以满足实验要求。根据T、B细胞膜表面标志及粘附能力等特性的不同,可将两者加以分离,常用的方法有E花结形成法、免疫吸附法和免疫磁性微珠分离法,近年来应用流式细胞仪可以分离出均质性的单一细胞类型或亚群。
(一)此法是基于成熟的T细胞表面有独特的绵羊红细胞(SRBC)受体,即E受体(CD2),能够与SRBC结合形成E-花环,而B细胞则不能,经Ficoll- Hypaque密度梯度离心后,即可将二者分开,然后裂解E-花环中的SRBC,即可获得纯T细胞,而B细胞可直接取自分层液的界面。近年来,用2-氨乙基异硫溴化物(AET)处理SRBC后,可增加E-花环形成效果与稳定性,从而提高T细胞的分离效率。