一、氨基酸的解离

氨基酸是兼性离子，其两性解离特性受溶液pH值影响。α-COOH的pKa值约为2.0，pH值大于3.5时，α-COOH以α-COO-形式存在；α-ΝΗ2的pKa值约为9.4，pH值小于8.0时，α-ΝΗ2以α-ΝΗ3+形式存在。

当pH值在3.5-8.0范围内，氨基酸以两性离子形式存在。在pKa值时，氨基酸的缓冲能力最强。

His是唯一具有接近中性的pKa基团（咪唑基）的氨基酸，也是唯一在生理pH条件下具有缓冲能力的氨基酸。

二、计算氨基酸的等电点(pI)

氨基酸的pI指氨基酸的正离子浓度与负离子浓度相等时的溶液pH值。pI相当于氨基酸兼性离子状态两侧基团pK值之和的一半。

中性氨基酸pI=(pKα-COOH+pKα-NH2)/2

酸性氨基酸pI=(pKα-COOH+pKR)/2

碱性氨基酸pI=(pKα-NH2+pKR)/2

举例：酸性氨基酸-天冬氨酸的pI

碱性氨基酸-赖氨酸的pI

酸性氨基酸pI在3左右，中性氨基酸pI在6左右（因α-COOH解离程度略大于α-NH2），碱性氨基酸pI在10左右。

等电点时，氨基酸的缓冲能力最小。

三、蛋白质的等电点（pI）

蛋白质溶液处于某一pH值时，蛋白质解离成正离子、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH值称为蛋白质的等电点（pI）。

在等电点时，蛋白质失去胶体的稳定性，即失去了电荷相互排斥作用，蛋白质分子不稳定，溶解度最小，易沉淀，即等电点沉淀。

四、计算寡肽等电点

先分析每个氨基酸的带电性质，尤其侧链基团的带电量，写出解离方程，找出兼性离子（静电荷为0时）两侧的pK值，取二者的平均值。

注意：这种方法仅适用于氨基酸或寡肽，对于多肽和蛋白质，由于侧链基团多，解离情况复杂，无法计算，只能从实验中测得等电点。

小结：

氨基酸是兼性离子：pKa时，缓冲能力最强。α-COOH解离程度略大于α-NH2。

氨基酸的pI：相当于氨基酸兼性离子状态两侧基团pK值之和的一半，pI时，缓冲能力最小。

蛋白质的pI：特征常数，只能从实验测得；pI时，溶解度最小（等电点沉淀）。

寡肽pI的计算：根据各基团pKa值写出解离方程，再找出兼性离子两侧的pK值，计算平均值。