主要区别有，发音不同、字义不同、用法不同，具体如下：

一、发音不同

1、你

普通话读音：nǐ。

2、您

普通话读音：nín。

二、字义不同

1、你

称呼说话的对方，是普通的称谓。

2、您

代替“你”字表示敬称。

三、用法不同

1、你

适用于平辈之间，长辈对于晚辈，上级对于下级的称谓。

2、您

适用于晚辈对于长辈，或者下级对领导的的称谓。

参考资料来源：百度百科-你

参考资料来源：百度百科-您

参考资料来源：百度百科-你和您