毕节21路公交车路线分为两个方向，一是从花牌坊到毕节一中，二是从毕节一中到花牌坊。

从花牌坊到毕节一中的路线为：花牌坊→东客站→阳明眼科医院→麻园天桥→区粮食局→桂花路→毕节一中初中部→市妇幼保健院→洪南农贸市场→光大银行→兰苑前门→市行政办公中心→大兰村→实验小学→大兰村一号站→市实验小学流仓分校→远航七星万象城→张家湾→罗家湾→赵家湾→岔河路口→甘堰塘隧道→半边街→二堡村六组→毕节国际汽配城→海坝→梨树路口→江西坡→廖家坝→毕节财校→毕节医专东门→毕节医专南门→金海湖体育场→毕节职院北门→毕节职院东门→毕节职院南门→毕节幼专→毕节工职院→金海湖公园→杨柳社区→金海湖一小→夹岩水库安置小区→招呼站→金海湖政务中心→毕节一中。该方向首班车时间为06:40，末班车时间为18:00。

从毕节一中到花牌坊的路线为：一中新校区→金海湖政务中心→浙毕医院金海湖院区→夹岩水库安置小区→金海湖一小→杨柳社区→金海湖公园→毕节工职院→毕节职院东门→毕节职院北门→金海湖体育场→毕节医专南门→毕节医专东门→毕节财校→招呼站→廖家坝→招呼站→联合村→招呼站→江西坡一号站→江西坡→幸福小镇→甘河街道办事处→招呼站→梨树路口→海坝→毕节国际汽配城→二堡村六组→半边街→甘堰塘隧道→岔河路口→赵家湾→罗家湾→远航七星关万象城→市实验小学流仓分校→大兰村一号站→实验小学→大兰村→市行政办公中心→兰苑前门→光大银行→洪南路口→市实验高中→市妇幼保健院→拥军路→麻园天桥→中国移动→东客站→花牌坊。该方向首班车时间为07:10，末班车时间为20:40。

毕节21路公交车由毕节市公交客运有限责任公司负责运营，发车间隔约为18-27分钟/趟，但具体发车时间可能会根据实际情况有所调整。乘客在乘坐时，请留意站牌上的实时信息，以合理安排出行时间。此外，毕节21路公交车路线较长，途经多个重要地点，包括学校、医院、市场等，为市民的出行提供了极大的便利。