【答案】：PCR一般以3种不同的温度进行。第一步，模板DNA变性，95℃温育1分钟。第二步，退火，使反应冷却下来以使引物与模板结合，这一步的精确温度由引物的融合温度决定，即引物能够与模板稳定结合的最高温度，一般为55℃，这依赖于引物的长度(引物越长、G+C含量越高，融合温度越高)。一般来说，较高的融合温度有助于确保引物只与模板上正确的靶序列退火结合。第三步，在DNA聚合酶的最适温度下进行。DNA聚合酶从耐热细菌中分离而来，常用于PCR反应，可在74℃下进行孵育，这种热稳定的DNA聚合酶的另一个好处就是它可以在95℃短时间孵育后仍保持活性。因此，可完成多个循环，而不必每循环后补加DNA聚合酶。